二氧化碳培養(yǎng)箱的應(yīng)用及維護(hù)

    說(shuō)到二氧化碳培養(yǎng)箱大家可能對(duì)它的名字比較熟知，但對(duì)它的真正了解可能不是太多，前面我們也提到過(guò)它的兩種常見(jiàn)的工作形式，今天我們主要說(shuō)說(shuō)它的應(yīng)用范圍及一些維護(hù)技巧。

二氧化碳培養(yǎng)箱主要是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類(lèi)似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，如穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對(duì)飽和濕度（95%），來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。因?yàn)樗@樣*的特性使它廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精（IVF）、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。其原理是應(yīng)用人工的方法在培養(yǎng)箱內(nèi)造成微生物和細(xì)胞、細(xì)菌、病毒生長(zhǎng)繁殖的人工環(huán)境，如控制一定的溫度、濕度、氣體等，主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。

正因?yàn)樗桥囵B(yǎng)細(xì)胞和細(xì)菌的設(shè)備，那么對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō)，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的，而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)。

如病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離，丟棄處理，相對(duì)來(lái)說(shuō)容易處理，對(duì)操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

支原體：支原體污染后，因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì)胞無(wú)明顯變化，外觀上給人以正常感覺(jué)，實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形，影響DNA合成，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等，往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。

細(xì)菌：細(xì)菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯，應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離，滅菌后丟棄，還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)。

     真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒(méi)有好的抑制方法，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復(fù)爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。

     所以對(duì)于二氧化碳培養(yǎng)箱而言，其培養(yǎng)細(xì)胞的本身對(duì)細(xì)胞、細(xì)菌的污染防治也是尤為重要的，否則我們的實(shí)驗(yàn)將會(huì)產(chǎn)生適得其反的效果。